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細胞劃痕實(shí)驗是觀(guān)察掌握細胞遷移實(shí)驗過(guò)程中細胞活動(dòng)的重要實(shí)驗方法。

問(wèn)題一：細胞劃痕實(shí)驗為什么這么重要

答：因為細胞劃痕實(shí)驗是觀(guān)察細胞遷移活動(dòng)的重要技術(shù)手段，而且簡(jiǎn)單快捷、經(jīng)濟實(shí)惠（劃重點(diǎn))。

問(wèn)題二：細胞劃痕實(shí)驗為什么一般選擇6孔板

答：因為6孔板大小適中，可保證有相當距離的平直劃痕，便于觀(guān)察;當然若是需要高通量初篩時(shí)，也可以用12或者24孔板。

問(wèn)題三：為什么細胞接種密度要求過(guò)夜100%融合

答：如果過(guò)夜后細胞=沒(méi)有100%融合，雖然可以適當延長(cháng)培養時(shí)間，但因細胞密度已經(jīng)很大，所以細胞狀態(tài)會(huì )逐漸變差，后續細胞可能不遷移而是凋亡。

問(wèn)題四：怎樣避免細胞增殖對細胞遷移實(shí)驗造成的假陽(yáng)性結果

答：操作如下:

1、使用無(wú)血清或低血清培養基(<2%)可降低細胞增殖對實(shí)驗結果的影響。

2、一般認為24h為細胞的一個(gè)周期，在選取合適的時(shí)間點(diǎn)(6，12，24h)檢測劃痕寬度時(shí)，不要超過(guò)細胞一個(gè)周期的時(shí)間。

問(wèn)題五：結果怎樣拍照

答：按照6孔板背后畫(huà)線(xiàn)的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點(diǎn)，劃痕一次與5條定位線(xiàn)相交，就有10個(gè)可固定監測點(diǎn)，以解決了前后觀(guān)察時(shí)位置不固定的問(wèn)題。

問(wèn)題六：細胞不遷移怎么回事

答：避開(kāi)細胞狀態(tài)的影響，需要考慮細胞自身的遷移能力，并非所有細胞都適合劃痕實(shí)驗。

問(wèn)題七：結果統計中，細胞計數和統計面積那個(gè)好用

答：根據細胞劃痕實(shí)驗的實(shí)驗結果選擇。如果細胞遷移輪廊比較清晰，并且遷移數量不多，我們可以選擇細胞計數；但如果細胞數比較多，連片生長(cháng)，那么統計面積比細胞計數的方式更簡(jiǎn)便且客觀(guān)。

問(wèn)題八：細胞劃痕技術(shù)有什么不足嗎

答：細胞劃痕實(shí)驗的不足主要包括：

1、適用的細胞類(lèi)型范圍小，一是需要遷移強的細胞，而且對無(wú)血清的環(huán)境有較強的忍受力(至少24h)12h細胞凋廣就超過(guò)50%。

2、自身操作的實(shí)驗誤差，如劃痕距離不一致等。

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